产 品 名 称 | PCR产物纯化试剂盒 PCR Purification Kit |
货 号 | DE-03011 |
规 格 | 50T |
价 格 | ￥232.00 |
描 述 | 该试剂盒适用于回收PCR产物中DNA片段(60bp-10kb)。 |
产品介绍
该试剂盒采用本公司研制的离心柱和配方，可以从PCR体系中高效率的回收高纯度DNA片段。该纯化柱能高效的结合DNA，搭配独特的配方试剂使得不经过胶回收便可直接去除引物二聚体。
试剂盒回收DNA片段范围广，一般条件下可以回收短至60bp的DNA片段。最小可以使用30μl洗脱液，提高回收DNA浓度。
试剂盒操作便捷，步骤少，只需数次离心即可同时处理多个样品，15分钟即可获得高纯回收DNA片段。
试剂盒应用
该试剂盒适用于回收PCR产物中DNA片段(60bp-10kb)。
回收DNA片段的应用
PCR产物纯化试剂盒回收获得的DNA片段纯度高，可用于常规分子生物学操作，如：酶切、连接、PCR、测序等实验。
DNA回收率
鉴于纯化柱的特性，对于不同片段的DNA其吸附能力以及洗脱效率也不一样，因此DNA回收的效率会有所不同。下图为从PCR体系中回收225bp DNA片段对比：
试剂盒内容
Buffer BD：调节PCR产物体系，使DNA片段能更好的结合到硅胶膜上。
Buffer BD-S：补充调节PCR产物体系。
Buffer WB1：去除DNA中的残留的盐离子。
Buffer EB：洗脱纯化柱膜上的DNA。
DNA-Only Column：特异吸附混合体系中的基因组DNA。
产品信息
型号 | 离心柱型 | 纯化组件 | Foregene离心柱、试剂 |
通量 | 1-24个样品 | 制备时间 | ~15 min(24个样品) |
离心机 | 台式离心机 | 纯化柱DNA承载量 | 80 μg |
离心柱液体盛装量 | 800 μL | 最小洗脱体积 | 30 μL |
PCR体系 | 50 μL / Prep | 回收效率* | 80-95% |
操作流程
说明书
产品文献
Association between inflammatory-response gene polymorphisms and risk of acute kidney injury in children
Jing He, Guoyan Xie, Hui Wu, Song Xu, Jun Xie, Youyuan Chen, Xinqian Zhao
贵州省毕节第一人民医院儿科
Bioscience Reports ( IF 2.899 ) Pub Date : 2018-12 , DOI: 10.1042/BSR20180537
文章链接：http://www.bioscirep.org/content/38/6/BSR20180537
MSDS
COA
回收不到DNA片段或回收效率低
Answer
通常会有多种因素影响PCR产物回收效率，比如：PCR体系本身DNA含量、洗脱体积等。
1. PCR体系中没有目的条带。
建议：确认用于回收的PCR体系中有特异的目的条带(如果不能确定PCR体系中是否含有目的条带，可以取少量PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析)。
2. BufferBD加入比例不合适或没有加异丙醇。
建议：参照试剂瓶上的标签所示的体积加入相应的异丙醇，且操作过程中按照操作说明在PCR产物体系中添加正确体积比例的Buffer BD，并充分混匀。
3. DNA片段≥2kb时回收率较低。
建议：按照操作说明书中步骤，在PCR产物体系中添加正确体积的Buffer BD-S。
4. BufferWB1中忘记添加无水乙醇。
建议：参照说明书或试剂瓶上标签在Buffer WB1中添加正确体积的无水乙醇并混匀。
5. 洗脱液添加不正确。
建议：确认Buffer EB或ddH2O滴加到了纯化柱膜中间位置；尤其是进行小体积洗脱的时候，一定要确定洗脱液滴加的位置正确，否则会导致无法回收到DNA。
6. 洗脱液使用不正确。
建议：有些特殊需求的实验需要使用纯水洗脱，请确定洗脱液的pH在7.0-8.5之间，否则将很大程度上影响洗脱效率。
回收的DNA影响下游实验
Answer
1. 洗脱下来的DNA片段中盐离子浓度过高。
建议：结合DNA片段的纯化柱在加入700μL Buffer WB1后，在室温放置5min再离心，以便能彻底的去除盐离子。
2. 洗脱下来的DNA片段中含有乙醇残留。
建议：Buffer WB1洗涤纯化柱后，12,000rpm (~13,400×g )空管离心2min一定不能省略；如果还有乙醇残留可以将纯化柱在室温放置2-5min再进行洗脱或者以13,400rpm (~17,000×g )离心2min。
