产 品 名 称 | 动物组织总RNA提取试剂盒 Animal Total RNA Isolation Kit | |
货 号 | RE-03011 | RE-03014 |
规 格 | 50T | 200T |
价 格 | ¥652.00 | ¥2,227.00 |
描 述 | 快速从多种动物组织、培养细胞中纯化高质量总RNA，试剂盒包含Foregene纯化柱及试剂。 | |
产品介绍
该试剂盒采用第三代RNA提取技术，可以从各种动物组织中高效率的提取得到高纯度高质量的总 RNA。提供高效的 DNA-Cleaning Colunm，能轻松的让上清液和组织裂解物分离并吸附除去基因组 DNA，操作简便、省时；该 RNA-only Column 能高效的结合 RNA，搭配独特的配方，可以同时处理大量样品。
全体系 RNase-Free，使得提取的 RNA无降解；Buffer RW1、Buffer RW2 缓冲液洗涤体系，使得获得的 RNA 无蛋白、无 DNA、无离子、无有机化合物污染。
试剂盒应用
该试剂盒适用于多种新鲜或冻存的动物组织或培养细胞总RNA提取纯化。
纯化RNA的应用
动物组织总RNA提取试剂盒提取得到的总RNA可用于各种下游分子实验，例如：cDNA合成，RT-PCR、Real Time PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译、芯片分析、PolyA筛选、分子克隆和RNase保护分析等。
RNA提取得率和纯度
使用动物组织总RNA提取试剂盒纯化得到的RNA，其产量与组织初始量、组织新鲜程度、组织保存时间以及操作相关。以下是使用该试剂盒提取RNA，各种组织其RNA得率与纯度，实际操作中，可能与该数据有些许出入。
组织类型 | 总RNA产量(μg) | OD260/280 | OD260/230 |
心 | 5-20 μg/10mg组织 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
肝 | 40-60 μg/10mg组织 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
脾 | 30-50 μg/10mg组织 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
肾 | 25-35 μg/10mg组织 | 1.8-2.1 | 1.7-2.0 |
脑 | 3-10 μg/10mg组织 | 1.8-2.1 | 1.5-1.7 |
细胞 | 10-30 μg/106细胞 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
储存条件
常温(15–25℃)，有效期为 24个月。
试剂盒内容
Buffer RL1：提供动物组织研磨裂解所需的环境。
Buffer RL2：提供 RNA 的特异上柱环境。
Buffer RW1：去除 RNA 中的蛋白质、DNA 等杂质。
Buffer RW2：去除 RNA 中残留的盐离子。
RNase-Free ddH2O：洗脱纯化柱膜上的总 RNA。
DNA-Cleaning Column：特异吸附组织裂解产物中的 DNA，并过滤除去裂解产物 中的固体杂质。
RNA-only Column：特异吸附上通过 DNA-Cleaning Column 滤液中的总 RNA。
产品信息
型号 | 离心柱型 | 纯化组件 | Foregene离心柱、试剂 |
通量 | 1-24个样品 | 制备时间 | ~20min(24个样品) |
离心机 | 台式离心机 | 组织裂解物分离 | 离心分离 |
纯化柱RNA承载量 | 160 μg | 离心柱液体盛装量 | 800 μL |
洗脱体积 | 50-200 μL | 组织样本处理量 | 组织：10-20mg、细胞：(1-5)×106 |
操作流程
说明书
产品文献
TheAttenuation of Trophoblast Invasion Caused by the Downregulation of EZH2 IsInvolved in the Pathogenesis of Human Recurrent Miscarriage
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Dysfunction ofDNA damage-inducible transcript 4 in the decidua is relevant to thepathogenesis of preeclampsia
Jieqiong Yang, Yachao Zhang, JingTong, Hong Lv, Cong Zhang, Zi-Jiang Chen
Biology ofReproduction ( IF 3.184 ) PubDate : 2018-02-13 , DOI：10.1093/biolre/ioy038
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辅助生殖与生殖遗传学重点实验室
文章链接：https://academic.oup.com/biolreprod/article-abstract/98/6/821/4855937?redirectedFrom=fulltext
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Ting Huang, Xuhao Song, Jie Jing, KeleiZhao, Yongmei Shen,Xiuyue Zhang and Bisong Yue Contributed equally
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文章链接：https://link.springer.com/article/10.1186/s12951-018-0337-2
Downregulation of decidual SP1 and P300 is associated withsevere preeclampsia
Yachao Zhang, Jieqiong Yang, Shijian Lv1, Dong-Qin Zhao,Zi-Jiang Chen, Wei-Ping Li and Cong Zhang
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文章链接: http://europepmc.org/abstract/MED/29273682
BMAL1 facilitates trophoblast migration and invasion viaSP1-DNMT1/DAB2IP pathway in recurrent spontaneous abortion
Shang Li, Junyu Zhai, Jiansheng Liu, Yan Hong, Weixiu Zhao,Aimin Zhao, Kang Sun, Yanzhi Du, Zi-Jiang Chen
上海市辅助生殖与生殖遗传学重点实验室
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Zinc finger gene 217 (ZNF217) Promoted OvarianHyperstimulation Syndrome (OHSS) through Regulating E2 Synthesis and InhibitingThrombospondin-1 (TSP-1)
Junyu Zhai, Jiansheng Liu, Xiaoyue Cheng, Shang Li, YanHong, Kang Sun, Zi-Jiang Chen, Yanzhi Du & Weiping Li
上海市辅助生殖与生殖遗传学重点实验室
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文章链接：https://www.nature.com/articles/s41598-017-03555-6
Regulatory network of GATA3 in pediatric acutelymphoblastic leukemia
Qianqian Hou, Fei Liao, Shouyue Zhang, Duyu Zhang, YanZhang, Xueyan Zhou, Xuyang Xia, Yuanxin Ye, Hanshuo Yang, Zhaozhi Li, LeimingWang, Xi Wang, Zhigui Ma, Yiping Zhu, Liang Ouyang, Yuelan Wang, Hui Zhang, LiYang,Heng Xu, Yang Shu
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四川省精准医疗重点实验室四川省生物治疗国家重点实验室
Oncotarget ( IF 5.168 ) PubDate : 2017-03-21, DOI：10.18632/oncotarget.16424
Effects of BMAL1–SIRT1-positive cycle on estrogen synthesisin human ovarian granulosa cells: an implicative role of BMAL1 in PCOS
Jiaou Zhang, Jiansheng Liu, Kai Zhu, Yan Hong, Yun Sun.Xiaoming Zhao. Yanzhi DuZi-Jiang Chen
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上海市辅助生殖与生殖遗传学重点实验室
文章链接：https://link.springer.com/article/10.1007/s12020-016-0961-2
Dysfunction of Liver Receptor Homolog-1 in Decidua:Possible Relevance to the Pathogenesis of Preeclampsia
Dongmei Zhang, Dong Cheng, Tao Liu, Yachao Zhang, Zi-JiangChen, Cong Zhang
上海市辅助生殖与生殖遗传学重点实验室
山东师范大学生命科学学院动物耐药性研究重点实验室
Plos One ( IF 3.234 ) PubDate: 2015-12-30, DOI：10.1371/journal.pone.0145968
文章链接：https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0145968
MSDS
COA
提取不到RNA或者RNA产量低
Answer
通常会有多种因素影响回收效率，比如：组织样本RNA含量、操作方法、洗脱体积等。
1. 操作过程中进行了冰浴或低温(4°C)离心。
建议：全程常温(15-25°C)操作，切勿冰浴和低温离心。
2. 样本保存不当或样本保存时间过久。
建议：样本保存于-80℃或冻存于液氮中，并避免反复冻融使用；尽量采用新鲜组织或培养的细胞进行RNA提取操作。
3. 样本裂解不充分。
建议：在组织匀浆时，请保证组织充分匀浆，组织细胞都被充分裂解释放RNA。
4. 洗脱液添加不正确。
建议：确认RNase-Free ddH2O滴加到了纯化柱膜中间位置。
5. Buffer RL2或Buffer RW2中没有添加正确体积的无水乙醇。
建议：请按照说明书，在试剂盒使用前，Buffer RL2和Buffer RW2中添加正确体积的无水乙醇并混匀。
6. 组织样本用量不合适。
建议：每500μl Buffer RL1使用组织量10-20mg或(1-5)×106个细胞，组织使用过多会导致RNA提取量降低。
7. 洗脱体积不合适或洗脱不彻底。
建议：纯化柱的洗脱液体积为50-200μl；若洗脱效果并不理想，建议在加入预热的RNase-Free ddH2O后，延长室温放置的时间，例如放置5-10min。
8. 纯化柱在Buffer RW2洗涤之后有乙醇残留。
建议：如果在Buffer RW2洗涤，空管离心1min后还有乙醇残留，可以将空管离心操作的时间增加至2min，或将纯化柱置于室温5min，以充分除去残留乙醇。
纯化获得的RNA有降解
Answer
纯化得到的RNA的质量和样本的保存、RNase污染、操作等因素有关。
1. 组织样本没有及时保存。
建议：组织样本或者细胞在收集后若不及时使用，请立即低温保存于-80℃或者液氮中。提取RNA请尽量使用新近采取的组织或细胞样本。
2. 组织样本反复冻融。
建议：组织样本保存时，最好切成小块保存，使用时取出其中一块即可，避免样本的反复冻融导致RNA的降解。
3. 操作间有RNase引入或没有佩戴一次性手套、口罩等。
建议：RNA提取实验最好在单独的RNA操作间进行，并在实验前清理好实验桌，实验时佩戴一次性手套、口罩，最大程度上避免RNase引入导致的RNA降解。
4. 试剂在使用过程中被RNase污染。
建议：更换新的Animal Total RNAIsolation Kit进行相关实验。
5. RNA操作时所用的离心管、枪头等有RNase污染。
建议：确认RNA提取时所用到的离心管、枪头、移液器等都是RNase-Free。
纯化获得的RNA影响下游实验
Answer
经纯化柱纯化的RNA，如果盐离子、蛋白质含量过多会影响下游实验，比如：逆转录、Northern Blot等。
1. 洗脱后的RNA有盐离子残留。
建议：确认Buffer RW2中添加了正确体积的乙醇，并按操作说明的离心转速进行2次纯化柱洗涤；如果还有盐离子残留，可在纯化柱加入Buffer RW2后，室温放置5min，再进行离心操作，以最大程度上去除盐离子污染。
2. 洗脱后的RNA有乙醇残留。
建议：确认Buffer RW2洗涤后，按操作说明的离心转速进行空管离心操作；如果还有乙醇残留，可以将空管离心操作的时间增加至2min，或者在空管离心后在室温放置5min，以最大程度上去除乙醇残留。
